臺盼藍之細胞染色
臺盼藍（Trypan Blue，也稱Direct blue 14）：一種死細胞染色用色素
化學(xué)名：
3,3'-bis（5-amino-4-hydroxy-2,7-naphthalenedisulfonic acid）, tetrasodium salt3,3’--雙（5-氨基-4-羥基-2,7-萘二磺酸），四鈉鹽
分子式：C34H24N6Na4O14S4
分子量：960.81
CAS Number： 72-57-1
外觀：黑褐色結(jié)晶粉末
摩爾吸光度：>69,000（在606nm附近）
染色原理：
細胞損傷或死亡時，臺盼藍可穿透變性的細胞膜，與解體的DNA 結(jié)合，使其著色。而活細胞能阻止染料進入細胞內(nèi)。故可以鑒別死細胞與活細胞。嚴格來說，臺盼藍染色檢測的是細胞膜的完整性，通常認為細胞膜喪失完整性，即可認為細胞已經(jīng)死亡。這被稱為染料排除測試（dye exclusion），Erythrosin B（紅色）、negrosine、eosin Y、AO和EB也用于此目的。通過顯微鏡很容易就能識別出死亡的被臺盼藍染色的細胞，并可使用細胞計數(shù)器進行計數(shù)。
溶于水，可以配制成10mg/ml的水溶液，水溶液呈深藍色。
臺盼藍主要用來鑒定原代培養(yǎng)細胞時,細胞分離后的存活情況，用0.4%臺盼藍直接染色5-10分鐘，在顯微鏡下觀察即可。
應(yīng)用于細胞凋亡：
如果細胞膜不完整、破裂，臺盼藍染料進入細胞，細胞變藍，即為壞死。如果細胞膜完整，細胞不為臺盼藍染色，則為正常細胞或凋亡細胞。盡管在凋亡的早期到中期檢測是很困難的，此方法對反映細胞膜的完整性，區(qū)別壞死細胞有一定的幫助。
儲存條件：常溫保存
注意事項：
1. 臺盼藍對人體有毒
2. 臺盼藍染細胞時，時間不宜過長。否則，部分活細胞也會著色，會干擾計數(shù)。
3. 臺盼藍染色法對于懸浮細胞來說，還比較方便，對貼壁細胞來說，較為繁瑣。因為要消化，有時，96孔板不一定能消化干凈。而且，該法是測定細胞濃度的方法，與細胞懸液的體積有關(guān)，加入的胰蛋白酶或1640要計入終體積?？梢哉f，該法相對準確，可能有一些人為因素的干擾。
通常認為細胞膜喪失完整性，細胞即可被認為已經(jīng)死亡。臺盼藍（Trypan Blue）是檢測細胞膜完整性zui常用的生物染色試劑。健康的正常細胞能夠排斥臺盼藍，而死亡的細胞，膜的完整性喪失，通透性增加，細胞可被臺盼藍染成藍色。依據(jù)此原理，細胞經(jīng)臺盼藍染色后，可通過顯微鏡，直接鏡下計數(shù)或拍照后計數(shù)，實現(xiàn)對細胞存活率比較的定量分析。
賽馳生物開發(fā)的細胞存活率檢測試劑盒（Cell Viability Assay Kit）以進口試劑為原料精心配制而成。該產(chǎn)品使用方便，操作簡單，全部操作只需3-5分鐘即可完成。本產(chǎn)品還配有細胞稀釋液，以便用戶在細胞密度較高時，可以很方便的進行計數(shù)細胞的稀釋。
包裝清單
| 細胞存活率檢測試劑盒 | 130000-T | 130000-T1 | 130000-T2 |
| 臺盼藍染色試劑 | 5ml | 10ml | 30ml |
| 細胞稀釋液 | 30ml | 60ml | 120ml |
| 說明書 | 1份 | 1份 | 1份 |
保存條件
4℃、無菌、密封保存，一年有效。
使用說明
1.收集細胞
貼壁細胞 先用胰酶和/或EDTA消化，吹打分散成單個細胞懸液；
懸浮細胞 直接吹打瓶底使成細胞懸液；
收集細胞懸液，用細胞稀釋液適當稀釋；或離心棄上清，估測細胞數(shù)量，向沉淀中適量加入細胞稀釋液，吹打重懸細胞。
2.臺盼藍染色
吸取100微升細胞懸液到EP管內(nèi)，加入臺盼藍染色液100微升，輕輕吹打混勻，3-5分鐘（染色時間不宜過長）后滴板計數(shù)。
3.細胞存活率分析
吸取適量加有臺盼藍染色液的細胞懸液，滴加血細胞計數(shù)板計數(shù)。于大方格內(nèi)分別計數(shù)細胞總數(shù)和藍染細胞數(shù)。
細胞存活率＝（細胞總數(shù)－藍色細胞數(shù)）/細胞總數(shù)X100%。
注意事項
本產(chǎn)品所提供的兩種溶液均經(jīng)過濾除菌，取用時在超凈臺內(nèi)進行，以免微生物污染。
染色試劑具有潛在的致癌性，為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
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