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一步法RT-PCR反轉(zhuǎn)試劑盒50次

一步法RT-PCR試劑盒是為從總RNA或mRNA中特異性的反轉(zhuǎn)和擴增目的RNA而設(shè)計的。該系統(tǒng)在一種優(yōu)化反應(yīng)體系中共用MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶的預(yù)混液，能夠檢測長達4.0 kb的RNA目的片段?？俁NA的用量可從0.01 pg到2 μg之間，該試劑盒為50 μl的反應(yīng)體系
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產(chǎn)品名稱 :

 一步法RT-PCR反轉(zhuǎn)試劑盒

品牌 :

 BIOMIGA

貨號 :

 RT0213-01

規(guī)格 :

 20次/50次/100次

詳細信息 :

 

產(chǎn)品簡介

 

一步法RT-PCR試劑盒是為從總RNA或mRNA中特異性的反轉(zhuǎn)和擴增目的RNA而設(shè)計的。該系統(tǒng)在一種優(yōu)化反應(yīng)體系中共用MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶的預(yù)混液，能夠檢測長達4.0 kb的RNA目的片段。總RNA的用量可從0.01 pg到2 μg之間，該試劑盒為50 μl的反應(yīng)體系。

 

試劑盒組分

 

產(chǎn) 品

RT0213-00

RT0213-01

RT0213-02

RT0213-03

Reactions

5

20

50

100

Enzyme mix: MMLV RT/ Hot start Taq Mix

5 μL

20 μL

50 μL

100 μL

2× Reaction mix （optimized bμffer contains dNTP and Mg2+）

125 μL

500 μL

1.25 mL

2×1.25 mL

5 mM Magnesiμm Sμlfate

125 μL

500 μL

1.0 mL

2×1.0 mL

dd H2O

150 μL

600 μL

1.5 mL

2×1.5 mL

 

保存條件

 

該試劑盒-20°C保存，在此條件下可保存二年。

 

產(chǎn)品特點

 

方便的一管式設(shè)置

*的RT-PCR緩沖液及高效性

高度敏感性、特異性及重復(fù)性

 

推薦RT-PCR反應(yīng)體系

 

建議用如下組成配制RT-PCR反應(yīng)起始液：

組分

50 μl 體系

終濃度

2× Reaction mix

25 μL

1×

Enzyme mix

1.0 μL

 

Forward Primer （10 μM）

1.0 μL

200 nM

Reverse Primer （10 μM）

1.0 μL

200 nM

RNA template

× μL

Variable （0.01pg - 2μg）

Final Volμme （μL）

50 μL

用dd H2O補足50 μL體系

*如有必要，鎂鹽濃度可進一步優(yōu)化。

1．將反應(yīng)溶液在冰上解凍。

2．按下列熱循環(huán)程序進行反應(yīng)，以便cDNA合成之后立刻進行PCR擴增。

     cDNA合成: 1 cycle: 40–50°C for 10 min

      變性: 1 cycle: 94°C for 2 min

      PCR 擴增: 40 cycles:

                     94°C for 15 s

                     55-65°C for 30 s

                     68°C for 1 min/kb

3．用凝膠電泳檢測RT-PCR擴增產(chǎn)物。



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